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2024 / 08 / 07
一文讲清体外细胞实验-细胞转染的目的、类型与方法
转染是将核酸（DNA或RNA）人工导入细胞的过程，采用各种化学、生物学或物理方法导入外源性核酸会改变细胞的特性，从而实现对细胞基因功能的研究。细胞转染技术在生命科学研究中具有广泛的应用，例如基因表达研究、功能研究、基因治疗和药物开发等，通过转染，可以实现基因编辑、蛋...
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2024 / 08 / 07
细胞冻存与复苏的超详细操作指南+小TIPS
细胞生物学研究中，为了让细胞能实现长期研究细胞生物学功能的效果，实验人员往往需要通过一些处理方式将良好状态的细胞保存起来，以备后期可以使用。细胞冻存是细胞保存的主要方法之一。利用冻存技术将细胞置于-196℃液氮中低温保存，可以使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保...
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2024 / 08 / 07
干货超全 |细胞脂质体转染法操作步骤及注意事项
转染是细胞实验中广泛使用的技术，通过转染可将外源核酸（DNA、RNA等）引入细胞，从而对基因的产物或其功能进行研究，是基因编辑细胞构建必不可少的步骤。按照转染的原理，细胞转染的方法大致可分为物理介导（如电穿孔法、显微注射法、基因枪法）、化学介导（如磷酸钙共沉淀法、脂...
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2024 / 08 / 02
常染色质 vs 异染色质：基因调控的两大主角
01常染色质 vs 异染色质在进行CUT&Tag、CUT&RUN、ChIP等实验技术时，我们常常需要考虑目的基因是否位于常染色质（Euchromatin）或异染色质（Heterochromatin）区域。常染色质和异染色质在细胞核中的分布及其对基因表达的调控具有重要意义。为了帮助科研人员更有效地进行相关实验...
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2024 / 08 / 02
CUT&RUN：比CHIP更精准高效的染色质-蛋白互作技术
01CUT&RUN原理CUT&RUN 是一种在全基因组范围内检测蛋白质与 DNA 相互作用的技术。其原理是利用抗体引导的核酸酶对靶蛋白结合的染色质区域进行切割，产生的片段被释放到溶液中，随后通过测序等方法进行分析。该技术具有高分辨率、低背景噪音等优点，能够更精准地确定蛋白质在基...
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2024 / 08 / 01
EMSA凝胶迁移实验中常见问题及应对策略
01EMSA凝胶迁移实验问题汇总1.在探针的选择上，要考虑哪些重要因素？答：探针的长度应小于60bp，以有利于非结合探针和蛋白-探针复合物的电泳分离。如结合位点已初步被鉴定，则应用短的核酸探针（约为20bp），这样可避免其他位点的干扰。2．EMSA凝胶迁移实验同DNA Pull-down、ChIP...
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2024 / 08 / 01
【实验干货】（EMSA)蛋白-DNA互作凝胶迁移实验原理及应用
01什么是EMSA凝胶迁移实验？1. EMSA凝胶迁移实验背景：在分子生物学研究中，理解蛋白质和核酸（DNA&RNA）之间的相互作用是揭示基因调控机制的关键。转录因子等DNA结合蛋白质在基因的转录前调控中扮演着重要角色，它们通过与特定的DNA序列结合，激活或抑制目标基因的转录。类似地...
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2024 / 08 / 01
CUT&Tag技术的实验流程与注意事项
（一）实验材料准备CUT&Tag 技术的实验材料准备较为关键。首先，需选择高质量的抗体，确保其特异性和亲和力，以准确识别目标蛋白，建议选择CHIP级别或者是CUT&Tag-Seq级别的抗体。其次，准备磁珠，用于捕获与抗体结合的复合物。此外，还需准备合适的酶，如 pA-Tn5 转座酶，用于...
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2024 / 07 / 31
表观遗传研究新宠——CUT&Tag技术
01什么是CUT&Tag技术？CUT&Tag 技术是一种新兴的研究染色质开放性及组蛋白修饰的研究方法。与传统的 ChIP-seq 技术相比，CUT&Tag 所需的细胞起始量更少，60-100000个细胞就可以满足需要，实验操作更简便，信号背景更低，能更高效地检测到低丰度的靶蛋白结合位点，能够更精准地...
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2024 / 07 / 31
【实验干货】双荧光素酶报告基因实验的基本原理和应用方向详解
01什么是荧光素酶和双荧光素酶？荧光素酶报告基因检测是以荧光素（luciferin）为底物来检测萤火虫荧光素酶（Firefly Luciferase）活性的一种报告系统。荧光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin，在luciferin氧化的过程中，会发出生物荧光（bioluminescence），可通过荧光测定...
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